Бласттрансформация лимфоцитов
Бласттрансформация лимфоцитов — иммунобиологический феномен превращения стимулированных митогенами или антигенами В- и Т-лимфоцитов в иммунобласты. Чаще для оценки функционального состояния Т-лимфоцитов применяют ФГА и Кон А, а В-лимфоцитов ЛПС и МЛ. Обычно мононуклеарные лейкоциты, выделенные из периферической крови методом градиентного центрифугирования, культивируют в присутствии ФГА или другого митогена в течение 72 ч. Результаты реакции можно учитывать морфологически либо по включению радиоактивной метки. В первом случае из клеточной культуры готовят мазки, фиксируют их в метаноле и окрашивают по Романовскому-Гимзе. Не удивительно, что стоматологическое вмешательство может стимулировать данный процесс. Например, после удаления зуба уровни трансформированных лимфоцитов могут резко возрасти. И это, ожидаемо, приведет к изменению аналитических показателей крови.
В световом микроскопе с иммерсионной системой определяют процент бластов по отношению к общему количеству лимфоцитов. Результат может быть выражен в виде индекса стимуляции (ИС), представляющего собой отношение процента трансформированных клеток в опыте к проценту трансформированных к легок в контроле (культура без ФГА).
При радиометрическом учете реакции за 4-6 часов до окончания культивирования в лунки с культурой клеток вносят радиоактивную метку — H3 тимидин. Метка включается в ДНК пролиферирующих клеток. По окончании культивирования клетки переносят на фильтры и промывают. Фильтры высушивают и помещают во флаконы со сцинтилляционной жидкостью. Интенсивность включения метки оценивают на сцинтилляционном счетчике радиоактивности.
Результаты исследовании выражают в импульсах в минуту или в виде индекса стимуляции (ИС- отношение интенсивности включения метки в культуре с митогеном к уровню включения метки в контрольной пробе). При оценке результатов обращают внимание, как на интенсивность пролиферативного ответа, так и на высоту ответа в контрольных пробах Снижение пролиферативного ответа указывает на наличие ИДС, но механизмы его могут быть разными.
Обратите внимание