Иммуноферментный анализ (дифтерия)
Для проведения иммуноферментного анализа на предварительном этапе производят связывание соответствующего антигена с поверхностью лунки полистиролового планшета или пробирки. Экзотоксины, в частности — дифтерийный токсин (или анатоксин), содержат в своих молекулах высоко липофильный компонент и поэтому хорошо связываются с поверхностью полистирола. Результаты прямого ИФА отличаются высокой воспроизводимостью.
Если титры антител превышают 0,1 МЕ/мл, результаты ИФА хорошо коррелируют с результатами реакции нейтрализации in vivo на морских свинках, а также с результатами реакции нейтрализации в клеточных культурах. Если же титры антител низкие, имеются существенные расхождения между результатами ИФА и нейтрализационных тестов. Выявляемые с помощью реакции нейтрализации титры антител порядка 0,001 МЕ/мл могут быть в 10—100 раз выше титров, определяемых с помощью ИФА — соответственно 0,01—0,1 МЕ/мл.
Несколько лучшая корреляция отмечена при использовании модифицированного ИФА. В реакции торможения связывания токсина (РТСТ), являющейся модификацией ИФА, отмечена высокая корреляция (r = 0,91) с результатами реакции нейтрализации in vitro в клетках Vero.
Главным преимуществом ИФА является возможность определения с его помощью IgG-специфических противодифтерийных антител.
Обратите внимание